جهش زايي آلودگي هاي مختلف هوايي (ذرات معلق)

جهش زايي تركيبات آلي جدا شده (EOM) از ذرات معلق توسط آزمايشهاي مختلفي از جمله كشت سالمونتلا، متد ترميم DNA در سلول هاي كبد موش و آزمون ميكرونوكلئوس در موش، مورد بررسي قرار گرفته است. ذرات معلق از ۱۳ ناحيه شانگهاي در تابستان ۹۲ جمع آوري شدند. با جداسازي اسيد باز، تركيبات به سه جز

اخير، سرطان ريه از مهم ترين عوامل مرگ و مير در هر دو جنس بوده است.

البته علت اصلي سرطان ريه، مصرف دخانيات اعلام شده است ولي با اين حال بايد به دو پرسش پاسخ دهيم. اول اينكه تنها ۳۶% از تمام سرطانها و ۲۱% از مرگ ها ناشي از مصرف سيگار است، پس سيگار آن قدرها هم مهم نيست و بايد فاكتومهاي ديگري نيز وجود داشته باشد. دوم اينكه نسبت سرطان ريه در مردها به زنها ۳:۱ است در حاليكه نسبت سيگار كشيدن ۷:۱ مي باشد. اين اختلاف نيز قائدتاً ناشي از عوامل

شدند. اين نمونه برداري ها يك بار در ژانويه ۱۹۹۲ و بار ديگر در آگوست ۱۹۹۳ تكرار شدند. تاثيرات آن ها در سه سطح جهش در ژنها، تخريب ترميم DNA و تغييرات كروموزومي بررسي شدند.

لوازم و روشها

– نمونه گيري و استخراج تركيبات آلي

نمونه هاي ذرات معلق توسط سمپلرهاي با حجم بالا كه مجهز به فيلترهاي

نمايش شدند.

– سنتز DNA غير به برنامه ريزي شده

سلول هاي تازه كبد موش در محلول DMEM به همراه ۵% سرم بوين و هيدروكسي اوره (۰٫۰۱M) قرار گرفتند. سلولهاي موجود در محيط در حدود ۱۰^۶*۱ سلول تنظيم شد. ۱ ميلي ليتر از سوسپانسيون سلولي به يك لوله آزمايش منتقل شد. ۱۰ ميكركوري از تيميدين- [^۳H] و غلظتهاي مختلفي از نمونه هاي مورد مطالعه اضافه شدند. لوله در شيكر به مدت ۳^h در دماي ۳۷ درجه قرار گرفت. سلولها توسط فيلترهايي جدا شده و مقدار تيميدين- [^۳H] آنها تعيين شد.

– مدد ميكرونوكلئوس

زمستان حدوداً دو برابر تابستان است.

جدول ۳ خلاصه اي از مقدار تركيبات به دست آمده در هر يك از اجزاء استخراج شده است. از اين جدول اين گونه نتيجه مي شود كه پس از جداسازي اسيد و باز، بيشترين مقدار ماده در فاز خنثي و كمترين آن در جز بازي است و اين نتيجه مستقل از فصل نمونه گيري و يا محل آن است. مقايسه مقدار تركيبات آلي استخراج شده از نمونه E، نشان مي دهد كه EOM در زمستان بيشتر از تابستان است. مقدار تركيبات آلي جدول ۴ نتايج مربوط به متد جهش زايي را در موش TA98 نشان مي دهد. تمامي استخراج هاي دست نخورده، رابطه مستقيمي بين دز و پاسخ نشان مي دهند، البته به غير از نمونه هاي M,L كه در صورت حضور S9 از خود كاهش نشان مي دهند. موش TA100 برخلاف TA98، يك رفتار وابسته به دز از خود بروز نمي دهد. اگر تعداد كلني هاي بازگشتي موجود در يك پليت را كه دو برابر يا بيشتر از كنترل هستند، به عنوان پاسخ مثبت قبول كنيم: شكل ۲ كمترين دزي را نشان مي دهد كه در پليت متناظرخود پاسخ مثبت مي‌دهد(Minimum Effective Mutagenic Dose:MEMD). تاثير مستقيم استخراج دست نخورده در جهش زايي در فصل ها و مناطق مختلف

چه در حضور و چه در عدم حضور S9. فعاليت موتاژني نمونه A، عمدتاً شامل تاثيرات غيرمستقيم بوده و رابطه دز- پاسخ مشاهده مي شود. زير جزء خنثي در نمونه E، رابطه دز- پاسخ را همواره نشان مي دهد. زير جزء اسيدي موتاژني غيرمستقيم و زير جزء بازي مستقيم را از خود بروز مي دهند. نتايج حاصل از سوش TA100 هيچ پاسخ مثبتي را نشان نمي دهند. شكل ۴ نشان مي دهد كه اجزاي اسيدي، قطبي و آروماتيك حاصل از نمونه هاي تابستاني، فعاليت بيشتري را نشان مي دهند. توزيع فعاليت موتاژني تفاوت زيادي را در بين نمونه هاي زمستاني نشان نمي دهد.

– سنتز غيربرنامه‌ريزي شده DNA در سلولهاي كبد پس از تيمار باEOMها(UDS)

در شكل ۵، نتايج آزمايشهاي UDS آورده شده است. رابطه دز- پاسخ به خوبي قاب………………